Imobilizovaný CALB
CALB je imobilizován fyzikální adsorpcí na vysoce hydrofobní pryskyřici, kterou je makroporézní styren/methakrylátový polymer. Imobilizovaný CALB je vhodný pro aplikace v organických rozpouštědlech i bezrozpouštědlových systémech a za vhodných podmínek jej lze mnohokrát recyklovat a znovu použít.
Kód produktu: SZ-CALB- IMMO100A, SZ-CALB- IMMO100B.
★Vyšší aktivita, vyšší chirální selektivita a vyšší stabilita.
★Lepší výkon v nevodných fázích.
★Snadné vyjmutí z reakčního systému, rychlé ukončení reakcí a zabránění usazování proteinových zbytků v produktu.
★Lze recyklovat a znovu použít, aby se snížily náklady.
| Aktivita | ≥10000 PLU/g |
| Rozsah pH pro reakci | 5–9 |
| Teplotní rozsah pro reakci | 10–60 °C |
| Vzhled | CALB-IMMO100-A: Světle žlutá až hnědá pevná látka CALB-IMMO100-B: Bílá až světle hnědá pevná látka |
| Velikost částic | 300–500 μm |
| Úbytek hmotnosti sušením při 105 °C | 0,5 %–3,0 % |
| Pryskyřice pro imobilizaci | Makroporézní, styren/methakrylátový polymer |
| Reakční rozpouštědlo | Voda, organické rozpouštědlo atd. nebo bez rozpouštědla. Pro reakci v některých organických rozpouštědlech lze pro zlepšení reakčního účinku přidat 3 % vody. |
| Velikost částic | CALB-IMMO100-A: 200–800 μm CALB-IMMO100-B: 400–1200 μm |
Definice jednotky: 1 jednotka odpovídá syntéze 1 μmol propyllaurátu za minutu z kyseliny laurové a 1-propanolu při 60 °C. Výše uvedené CALB-IMMP100-A a CALB-IMMO100-B odpovídají imobilizovaným nosičům s různými velikostmi částic.
1. Typ reaktoru
Imobilizovaný enzym je použitelný jak v kotlíkovém dávkovém reaktoru, tak v kontinuálním průtokovém reaktoru s pevným ložem. Je třeba dbát na to, aby se zabránilo drcení v důsledku vnější síly během plnění nebo plnění.
2. Reakční pH, teplota a rozpouštědlo
Imobilizovaný enzym by měl být přidán jako poslední, po přidání a rozpuštění ostatních materiálů, a měl by být upraven pH.
Pokud spotřeba substrátu nebo tvorba produktu povede ke změně pH během reakce, je třeba do reakčního systému přidat dostatečné množství pufru nebo monitorovat a upravovat pH během reakce.
V rámci teplotního tolerančního rozsahu CALB (pod 60 °C) se rychlost konverze zvyšuje se zvyšující se teplotou. V praxi by měla být reakční teplota zvolena podle stability substrátu nebo produktu.
Obecně je hydrolýza esteru vhodná ve vodném systému, zatímco syntéza esteru je vhodná v organickém systému. Organickým rozpouštědlem může být ethanol, tetrahydrofuran, n-hexan, n-heptan a toluen nebo vhodné směsné rozpouštědlo. Pro reakci v některých organických rozpouštědlech lze pro zlepšení reakčního účinku přidat 3 % vody.
3. Opětovné použití a životnost CALB
Za vhodných reakčních podmínek lze CALB regenerovat a znovu použít a specifické doby aplikace se liší v závislosti na projektu.
Pokud se získaný CALB nepoužívá opakovaně a je třeba jej po získání skladovat, je třeba jej vyprat, vysušit a uzavřít při teplotě 2–8 °C.
Pokud se po několika cyklech opětovného použití mírně sníží účinnost reakce, lze CALB vhodně přidat a pokračovat v používání. Pokud se účinnost reakce výrazně sníží, je třeba jej vyměnit.
Příklad 1 (Aminolýza)(1):
Příklad 2 (Aminolýza)(2):
Příklad 3 (Syntéza polyesteru s otevřením kruhu)(3):
Příklad 4 (Transesterifikace, regioselektivní hydroxylové skupiny)(4):
Příklad 5 (Transesterifikace, kinetické štěpení racemických alkoholů)(5):
Příklad 6 (Esterifikace, kinetické štěpení karboxylové kyseliny)(6):
Příklad 7 (Esterolýza, kinetické rozlišení)(7):
Příklad 8 (Hydrolýza amidů)(8):
Příklad 9 (Acylace aminů)(9):
Příklad 10 (Aza-Michaelova adiční reakce)(10):
1. Chen S, Liu F, Zhang K a další. Tetrahedron Lett, 2016, 57: 5312–5314.
2. Olah M, Boros Z, anszky GH, et al. Tetrahedron, 2016, 72: 7249-7255.
3. Nakaoki1 T, Mei Y, Miller LM a další. Ind. Biotechnol, 2005, 1(2):126-134.
4. Pawar SV, Yadav G DJ Ind. Eng. Chem, 2015, 31: 335-342.
5. Kamble MP, Shinde SD, Yadav G DJ Mol. Catal. B: Enzym, 2016, 132: 61-66.
6. Shinde SD, Yadav G D. Process Biochem, 2015, 50: 230-236.
7. Souza TC, Fonseca TS, Costa JA a spol. J. Mol. Catal. B: Enzym, 2016, 130: 58-69.
8. Gavil'an AT, Castillo E, L'opez-Mungu'AJ Mol. Catal. B: Enzym, 2006, 41: 136-140.
9. Joubioux FL, Henda YB, Bridiau N a spol. J. Mol. Catal. B: Enzym, 2013, 85-86: 193-199.
10. Dhake KP, Tambade PJ, Singhal RS, et al. Tetrahedron Lett, 2010, 51: 4455-4458.
